選擇生長健康的、無病害的番茄幼根。例如，70%乙醇或次氯酸鈉等，用於表麵消毒植物材料。
分離番茄幼根的原生質體通常涉及使用纖維素酶等酶來酶解細胞壁，從而釋放原生質體。以下是一個一般的操作流程：
材料準備：
1. 番茄幼根：
選擇生長健康的、無病害的番茄幼根。
2. 表麵消毒劑：
例如，70%乙醇或次氯酸鈉等，用於表麵消毒植物材料。
3. 培養基：
含有植物生長激素（如激素、維生素等）的培養基，通常使用Murashige and Skoog培養基（MS培養基）。
4. 纖維素酶：
用於酶解細胞壁，釋放原生質體。
5. 實驗室用具：
顯微鏡、吸管、移液器、培養皿、濾紙等。
步驟：
1. 表麵消毒：
將番茄幼根在流水下清洗，去除表麵的塵土。
將番茄幼根浸泡在70%乙醇或次氯酸鈉等表麵消毒劑中，進行表麵消毒。消毒時間通常在幾分鍾到十幾分鍾之間。
2. 剪取組織：
使用無菌工具，剪下表麵消毒後的番茄幼根的根尖或幼根部分。這是富含分裂活躍細胞的部分，適合原生質體製備。
3. 酶解：
將剪下的番茄幼根組織放入含有纖維素酶的培養基中，進行酶解。酶解的時間和溫度根據實驗設計和植物材料的特性而定，通常需要在無菌條件下進行操作。
4. 過濾和洗滌：
將酶解後的混合物通過濾紙或濾器進行過濾，分離出纖維和殘渣。
使用含有植物生長激素的培養基洗滌殘渣，以去除酶液。
5. 原生質體分離：
使用顯微鏡和吸管等工具，從酶解後的混合物中分離出番茄幼根的原生質體。確保在無菌條件下進行操作。
6. 培養原生質體：
將分離得到的原生質體懸浮在含有植物生長激素的培養基中，提供適當的溫度和光照條件。
這是一個一般性的步驟概述，具體的實驗條件和步驟可能因實驗目的、植物品種和培養條件的不同而有所不同。在進行實驗之前，請確保閱讀相關的文獻和方法，以了解適用於您研究的特定條件。同時，進行實驗時，嚴格遵循無菌技術，以防止外部微生物的汙染。
